角质细胞叉头框蛋白O1基因调节血管内皮生长因子A的表达
【作者】
陆永健
唐震
汪大林
第二军医大学长海医院口腔科
上海200433
上海交通大学医学院附属新华医院口腔科
上海200092
【关键词】
叉头框蛋白O1
血管内皮生长
【摘要】目的通过体外实验在角质细胞中过表达或沉默叉头框蛋白O1(FOXO1)基因,研究其对血管内皮生长因子A(VEGF-A)蛋白水平和转录活性的影响。方法采用体外细胞培养和转染方法,分别用ON-TARGET plus SMART pool人FOXO1siRNA和对照siRNA(ON-TARGET plus Non-targeting Control Pool)转染人永生化牙龈角质细胞(human immortalized gingival keratinocyte,HIGK),用免疫荧光法检测HIGK中FOXO1和VEGF-A的免疫荧光强度,荧光酶素实验分别检测FOXO1过表达和FOXO1沉默时VEGF-A的活性。结果与未转染组相比,使用FOXO1siRNA转染的HIGK中VEGF-A的蛋白水平降低了57%(P〈0.05)。荧光酶素实验分析结果显示,在HIGK中过表达FOXO1后VEGF-A的转录活性增加了2.1倍(P〈0.05),而FOXO1沉默时VEGF-A的转录活性减少了20%~43%(P〈0.05)。结论角质细胞中FOXO1参与VEGF-A的表达调控。
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