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乙肝病毒X基因诱导肝细胞脂肪变性作用机制的研究

【作者】 张琴 [1] ; 彭俊 [2] ; 沈薇 [1]

【关键词】 肝X受体α 乙肝病毒X基因

摘要】目的探讨沉默肝X受体α(1iver X receptor α,LXRu)基因对HepG2.2.15细胞脂质代谢相关基因表达的影响。方法设立空白对照组(不转染任何质粒)、阴性对照组(转染阴性HK质粒)和shLXRα转染组(转染shLXRα质粒)。构建针对LXRα基因的shLXRα质粒并转染HepG2.2.15细胞,用荧光显微镜及蛋白质印迹法检测转染质粒24-96h绿色荧光蛋白和LXRα蛋白的表达以确定质粒的最佳干扰时间,根据结果给予激动剂T0901317刺激细胞,用三酰甘油(TG)含量检测肝细胞脂肪变性程度,RT-PCR检测固醇调节元件结合蛋白lc(sterol regulatory element binding protein-1e,SREBP-lc)mRNA的表达,蛋白质印迹法检测乙肝病毒X(hepatitis B virus X,HBx)蛋白及脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)蛋白的表达。结果成功构建shLXRα质粒并转染HepG2.2.15细胞。与空白对照组和阴性对照组比较,shLXRα转染组LXRα蛋白表达下降,于转染后48-72h表达最低,差异有统计学意义(P〈O.01);随着激动剂T0901317处理时间延长,各组HBx和FAS蛋白表达、TG含量、SREBP-lc mRNA水平均逐渐增加,同一时间点HBx蛋白在各组差异无统计学意义(P〉0.05),而FAS蛋白、TG含量、SREBP-lc mRNA水平,在shLXRα转染组中的表达较空白对照组和阴性对照组低,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论HBx对脂代谢的调控可能部分通过LXRα/SREBP-lc/FAS途径实现。

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        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
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        邮编:200433