【摘要】目的为了深入了解在胚胎发育过程中，尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制，选择斑马鱼作为实验动物，构建野生型斑马鱼pC^2＋-pax5重组质粒，并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼pax5基因片段，将得到的pax5基因片段和pCS^2＋质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后，在T4 DNA连接酶的作用下插入pCS^2＋质粒中，通过对重组质粒进行双酶切、菌落PCR以及插入片段序列测定鉴定后，经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的pax5基因的反义mRNA探针。将得到的探针用全胚胎原位杂交技术检测pax5基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。结果成功构建pCS^2＋-pax5重组质粒并制备了pax5基因的反义mRNA探针，通过斑马鱼原位杂交技术，发现在斑马鱼受精后18-72小时（18-72 hpf）胚胎头部的小脑、中脑后脑交界处均可观察到pax5基因阳性杂交信号；在24-72hpf胚胎的耳蜗均可观察到pax5基因的阳性杂交信号，且随着时相的增长其表达逐渐增多；在18-48 hpf胚胎的脊索部位可见pax5基因的阳性杂交信号。结论明确了pax5基因在斑马鱼胚胎的脑部、脊索神经系统高表达，并首次证实其在耳蜗听神经的早期发育过程中有表达，可能对斑马鱼早期胚胎神经系统的发育起着某些至关重要的作用。