NF-κB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡和相关分子
【作者】
樊浩
[1] ;
何松
[1] ;
汤为学
[2]
【关键词】
苦参碱
NF-κB
细胞凋亡
【摘要】目的探讨NF—wB沉默联合苦参碱(matrine,MT)诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及相关分子的表达。方法构建NF-KB/P65siRNA真核表达载体转染人肝癌细胞HepG2,RT—PCR检测NF-KB/P65基因沉默效果,并筛选出NF-xB/P65基因沉默稳定转染细胞株。将实验分为对照组、苦参碱组(1.5g/L)、稳转细胞组和联合组(稳转细胞+苦参碱),流式细胞仪检测细胞凋亡率;分别用RT—PCR法和蛋白质印迹法检测细胞NF-KB/P65、CD95(Fas)、Smac、Survivin的mRNA和蛋白水平表达。结果苦参碱组NF-KB/P65、CD95、Smac和Survivin的表达上调,与对照组比较差异具有统计学意义(P〈O.05);稳转细胞组CD95和Smac的表达上调,与对照组比较差异有统计学意义(P〈O.05),NF-KB/P65和Survivin的表达下调,与对照组、苦参碱组比较差异有统计学意义(P〈O.05);联合组CD95和Smac的表达上调,与对照组、苦参碱组、稳转细胞组比较差异有统计学意义(P〈O.05),NF-KB/P65和Survivin的表达下凋,与苦参碱组比较差异有统计学意义(P〈O.05)。各组细胞凋亡率分别为3.21%、6.25%、11.82%、21.06%,组间差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论NF-KB沉默联合苦参碱诱导人肝癌细胞HepG2凋亡可能与CD95和Smac的表达上调及NF-KB/P65和Survivin的表达下调有关。
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