人PRKAG2(R302Q)突变型SD乳鼠心肌细胞模型的建立及检测
【作者】
陈挺
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刘杰
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于云华
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鲍礼智
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康波
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郑兴
【关键词】
PRKAG2基因
突变
腺病毒包
【摘要】目的包装人PRKAG2(R302Q)突变型的腺病毒后感染原代SD乳鼠心肌细胞,构建细胞模型。方法首先通过BP及LR重组获得人PRKAG2(R302Q)突变型的腺病毒表达载体,将其线性化转染293细胞进行腺病毒包装和扩增。收集纯化腺病毒液感染原代SD乳鼠心肌细胞后进行蛋白质印迹法检测。结果 PRKAG2(R302Q)突变型的腺病毒载体经测序验证插入序列正确,腺病毒感染乳鼠心肌细胞后蛋白质印迹法检测其过表达明显(P〈0.05)。结论包装人PRKAG2(R302Q)突变型基因的腺病毒并成功感染SD乳鼠心肌细胞,为进一步研究基因PRKAG2(R302Q)突变体的功能奠定了基础。
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