【摘要】目的制备靶向输送针对核糖核苷酸还原酶RR小亚基M2（RRM2）的siRNA（RRM2-siRNA）的聚N-异丙基丙烯酰胺/聚乙烯亚胺（PNIPAM/PEI）纳米凝胶,通过研究其体外的抗肿瘤效应,以期构建新型靶向纳米凝胶递送基因系统。方法采用自由基接枝共聚合（radical graft copolymerization）反应制备具有＂核-壳＂结构的PNIPAM/PEI聚阳离子温度敏感型纳米凝胶,评价其粒径、zeta电位等理化性质;根据电荷相互作用原理,并通过偶联抗人表皮生长因子受体2（Her2）抗体,形成包裹RRM2-siRNA的靶向性PNIPAM/PEI-siRNA纳米凝胶复合体。利用凝胶电泳确定PNIPAM/PEI-siRNA纳米凝胶复合体包裹siRNA效果,通过荧光显微镜定性观察和流式细胞术定量检测人胃癌细胞NCI-N87对该纳米凝胶复合体的摄取情况,利用qPCR法检测该纳米凝胶递送siRNA后靶基因RRM2的表达情况,用Transwell法检测该纳米凝胶复合体对NCI-N87细胞迁移的影响。结果本研究合成具有＂核-壳＂结构的温度敏感型PNIPAM/PEI纳米凝胶,颗粒均匀,粒径为359.8nm,zeta电位为21.4mV。在此基础上,我们制备出靶向凝胶包裹RRM2-siRNA的纳米凝胶复合体,确定最佳包裹比例为N/P=60（N/P：聚阳离子纳米凝胶中氨基与质粒DNA中磷酸基的摩尔比）。不同温度下（37℃、42℃）细胞内吞实验证实,该纳米凝胶复合体具有良好的靶向性和温度响应性,且可以下调靶基因RRM2的表达,抑制NCI-N87细胞的迁移。结论成功制备抗体靶向的PNIPAM/PEI聚阳离子温度敏感型纳米凝胶,其可以结合并投递siRNA进入靶细胞,该纳米复合体可以作为新型抗肿瘤基因治疗的给药系统。