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抗新型锌指蛋白ZBTB45单克隆抗体的制备与应用

【作者】 王燕 [1] ; 王科嘉 [1] ; 李玲 [1] ; 陈榕 [1,2] ; 麻献华 [1] ; 郭小芹 [1] ; 张晔 [1] ; 邹大进 [2] ; 谢志芳 [1,3] ; 章卫平 [1]

【关键词】 锌指蛋白 转录因子 ZBTB45

摘要】目的制备新型锌指蛋白ZBTB45的单克隆抗体,建立该分子的体内外免疫学检测方法,为研究其生物学功能提供技术手段。方法制备小鼠ZBTB45的多表位抗原融合蛋白,免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测、多次有限稀释亚克隆建立分泌ZBTB45单克隆抗体的杂交瘤细胞株,从荷瘤小鼠的腹水中通过蛋白A柱纯化单克隆抗体,鉴定分析所制备抗体在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学中的应用效果。结果成功制备了6株抗ZBTB45的特异性单克隆抗体,其中3E5、2G4、4D2和1D4可成功用于免疫印迹和免疫沉淀分析,3E5、6D8和8E3可用于免疫组织化学检测内源性ZBTB45,具有较好的敏感性、特异性。结论首次成功制备了抗ZBTB45单克隆抗体,可应用于体外和体内的免疫学检测,为深入研究ZBTB45的生物学功能提供了技术支持。

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        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
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        邮编:200433