载脂蛋白D在常染色体显性多囊肾病中的表达及对囊肿衬里上
【作者】
胡文娟
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刘晔
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刘冬梅
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高翔
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李宏栋
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梅长林
【关键词】
载脂蛋白D
常染色体显性多
【摘要】目的探讨载脂蛋白D(apolipoprotein D,ApoD)在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidneydisease,ADPKD)发病中的作用。方法采用免疫组织化学及蛋白质印迹方法分析ApoD在ADPKD患者肾脏囊肿组织中的表达;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测Han:SPRD大鼠肾组织ApoD蛋白和基因表达的变化。应用MTT法检测人重组ApoD蛋白对ADPKD囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)增殖的影响;流式细胞术检测经人重组ApoD蛋白作用后WT9-12细胞的凋亡情况及细胞周期改变。结果 ADPKD患者及Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾组织中ApoD表达量分别低于正常人及Han:SPRD正常大鼠(+/+)肾组织(P〈0.05,P〈0.01)。8、12、16、24周龄Han:SPRD杂合型大鼠(cy/+)肾脏中Ap-oD基因表达量均低于同周龄Han:SPRD正常大鼠(+/+)(P〈0.05)。人重组ApoD蛋白以100、200、400 ng/ml作用于WT9-12细胞,作用48 h细胞增殖抑制率分别为8.21%、7.59%、8.07%(P〈0.05),作用72 h细胞增殖抑制率分别为8.62%、6.43%、9.42%(P〈0.05)。人重组表达ApoD蛋白以400 ng/ml浓度刺激细胞72 h,对细胞凋亡无明显影响,但可使G1期细胞增加8.26%,S期细胞减少8.09%(P〈0.05)。结论 ApoD蛋白可能通过调节细胞周期减弱WT9-12细胞增殖,其表达减少可能在ADPKD的发病过程中具有一定作用。
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