【摘要】目的构建携带微小RNA136（mir136）的真核表达载体并将其转染人结直肠癌细胞,观察外源性mir136表达对人结直肠癌细胞中钙结合蛋白S100A6表达及细胞增殖活性的影响。方法提取人肾上皮HEK293细胞基因组DNA,PCR扩增包含mir136前体序列的DNA片段并构建重组载体,采用阳离子脂质体法将重组载体转染人结直肠癌HCT116细胞。转染后48 h,采用实时定量PCR法检测细胞内mir136含量变化,以蛋白质印迹法检测细胞中S100A6蛋白的表达;转染后24和48 h,采用CCK-8试剂盒检测肿瘤细胞增殖活性;转染后48 h,以双染法检测细胞凋亡情况。结果成功构建重组mir136真核表达载体并转染HCT116细胞。转染后48 h,重组载体转染组HCT116细胞内mir136相对表达量高于未转染组（P〈0.01）,而S100A6蛋白的相对表达量则低于未转染组（P〈0.01）。同时,重组载体转染组HCT116细胞增殖活性较未转染对照组降低（P〈0.05）,而细胞凋亡则较未转染对照组增加（P〈0.01）。结论 Mir136可能通过抑制S100A6基因表达而抑制结直肠癌细胞增殖活性,同时引起细胞的凋亡。