外源性Muc1、Survivin和Nanog基因启动子在结肠癌干细胞中
【作者】
杜敏
[1] ;
葛海燕
[2] ;
徐彬
[1]
【关键词】
Muc1
Nanog
Survivin
启
【摘要】目的探讨结肠癌干细胞中不同基因启动子的活性,寻找可能用于结肠癌干细胞靶向治疗的启动子。方法应用流式细胞仪分选人结肠癌HCT116细胞系中CD133^+CD44^+标记的肿瘤干细胞。采用PCR技术获取Nanog、Muc1和Survivin基因启动子并分别克隆入pGL3-basic质粒。将含有启动子的pGL3-basic质粒和pGL3-control质粒分别与pRL-sv40共转染结肠癌细胞(HCT116、SW620、HT29)、结肠癌干细胞(CD133^+CD44^+HCT116)及人正常肝细胞(QSG7701),通过检测双荧光素酶活性以测定启动子活性。结果pGL3-basic-Nanog、pGL3-basic-Muc1、pGL3-basic-Survivin经测序鉴定正确。HCT116细胞系中CD133+CD44+细胞比率约占42.2%。双荧光素酶活性检测显示:在HCT116、SW620、HT29和CD133+CD44+HCT116细胞中,Muc1与Survivin均表现出了较强的活性,而在正常细胞QSG7701中活性较低。结论 Muc1、Survivin启动子可能是用于靶向结肠癌干细胞治疗的有效候选启动子。
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