【摘要】目的构建含转录因子ChREBP-a基因的重组腺病毒载体，检测其在小鼠原代肝细胞中的表达及其对脂质合成的调节作用。方法将ChREBP-acDNA克隆到穿梭质粒pShuttle—CMV载体，与pAdEasy质粒在大肠杆菌BJ5183中同源重组，获得腺病毒载体pAd—ChREBP-a，在293A细胞中进行病毒的包装和扩增，检测病毒的滴度；将腺病毒Ad—ChREBP-a感染小鼠原代肝细胞，用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测ChREBP—a的表达，实时荧光定量PCR检测ChREBP—a靶基因LPKrnRNA的表达。用核素^14C示踪法测定肝细胞的脂质合成速率。结果成功制备了ChREBP-a重组腺病毒，利用其在原代肝细胞过表达ChREBP—a，可显著上调靶基因LPK的表达，并增强肝细胞的脂质合成速率。结论成功制备了具有生物学活性、能在原代肝细胞中过表达的ChREBP-a重组腺病毒，为研究ChREBP—a的糖脂代谢调控作用奠定了基础。