【摘要】[摘要]目的观测胰岛素转录关键调控因子胰腺十二指肠同源框蛋白1（PDX-1）、神经分化因子1（NeuroDl）及肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A（MafA）对小鼠诱导多潜能干细胞（iPS细胞）分化为胰岛素分泌细胞的作用。方法筛选鉴定小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）重编程的iPS细胞。以重组腺病毒AdmPDX-1-IRES-GFP、AdmNeuroDl-IRES-GFP、Ad—mMafaIRES-GFP联合感染小鼠iPS细胞，体外培养后以RT—PCR检测胰岛B细胞功能基因表达；免疫荧光检测胰岛素蛋白表达及定位；ELISA检测不同糖浓度（O、5、10、20、30、40mmol／L）下胰岛素的分泌量。结果起源于MEFs的iPS细胞能形成边缘光整的致密克隆，表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1，并能在体内外分化为三胚层组织，显示MEFs被成功地重编程为iPS细胞。Ad—PDX-1-IRES-GFP、Ad—mNeuroD-IRES-GFP、Ad—mMafA—IREs_GFP感染的小鼠iPS细胞能分化为胰岛类B细胞，RT—PCR结果显示其胰岛B细胞功能基因的表达与小鼠胰岛B细胞株MIN6相似。免疫荧光检测可见胰岛类B细胞内有胰岛素表达。ELISA检测结果显示胰岛类B细胞对不同浓度葡萄糖有较好的反应性。结论胰岛素转录关键调控因子PDX-1、NeuroDl和MafA三者能协同作用，使小鼠iPS细胞分化为具有显著胰岛素合成和分泌能力的胰岛素分泌细胞。