【摘要】目的制备人去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）的小鼠单克隆抗体，并应用该抗体检测ASGPR在细胞系和组织中的表达。方法对ASGPRH1大亚基进行序列分析，选取ASGPRl全长序列制备免疫原。通过RT-PCR合成ASGPRlcDNA，构建ASGPRl表达重组载体，在E．coliBL21中表达后纯化，获得目的抗原。应用传统融合杂交瘤技术制备小鼠单克隆抗体，常规检测单抗亚类和效价，竞争抑制实验鉴定单抗特异性。用流式细胞术和免疫组织化学法分别检测ASGPR在多种肝源性与非肝源性细胞系以及多种肝组织中的表达。结果制备的单克隆抗体亚型为IgGl，效价达1：12800。竞争抑制实验结果显示该单抗具有很好的ASGPR结合特异性，而且识别的肽段位于ASGPR胞外段。流式细胞术检测结果显示，ASGPR不同程度地表达于肝源性细胞系，但不表达于非肝源性细胞系。免疫组织化学检测结果显示，ASGPR专一性表达于正常肝组织和肝癌组织，在肝癌组织的表达与分化程度有关，高分化肝癌中的阳性率高于低分化肝癌（75．0％VS28．6％，P〈0．05）。结论成功制备高特异性人ASGPR小鼠单克隆抗体，适用于用流式细胞术和免疫组织化学法检测ASGPR表达，可用于临床病理鉴定原发性肝癌与转移性肝癌。