【摘要】目的 构建表达小鼠新基因mgt-16的反转录病毒载体，并观察其在小鼠胚胎间充质干细胞C3H/10T1/2（简称10T1/2细胞）中的表达。方法 以含小鼠新基因mgt-16的DNA序列为模板PCR扩增得到mgt-16编码序列，T-A克隆后测序获得pMD18T-16质粒，与真核表达载体pEGFP-N1酶切、连接、转化，通过PCR、酶切鉴定和测序获得正确的pEGFP-N1-16载体。将pEGFP-N1-16载体中含mgt-16的片段克隆至反转录病毒载体pLEGFP-N1，通过酶切鉴定和测序获得正确的pLEGFP-N1-16反转录病毒载体。将pLEGFP-N1-16转染反转录病毒包装细胞Phoenix，制备携带mgt-16与增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP）的反转录病毒，感染小鼠间充质干细胞10T1/2后，400 μg/mL G418 筛选获得稳定表达mgt-16与EGFP融合蛋白的10T1/2细胞克隆。荧光显微镜观察MGT-16蛋白的表达及亚细胞定位。结果 PCR扩增得到大小约300 bp的mgt-16条带，T-A克隆后测序显示获得的mgt-16序列与Genbank数据库序列相同。构建的pEGFP-N1-16载体经PCR、酶切鉴定和测序验证构建成功，构建的反转录病毒载体pLEGFP-N1-16经酶切鉴定和测序验证构建成功。荧光显微镜观察MGT-16主要在Phoenix细胞和小鼠间充质干细胞的细胞质表达，核周表达水平较高。结论 成功构建了小鼠新基因mgt-16的反转录病毒载体，并在间充质干细胞中表达，为进一步研究新基因mgt-16在间充质干细胞中的功能奠定了基础。