06 现在的位置:首页 > 期刊导读 > 2014 > 06 >

旋转超滤:一种提取细胞外泌体的新方法

【作者】 胡国文 [1] ; 李青 [2] ; 牛鑫 [2] ; 胡斌 [2] ; 刘鹃 [1] ; 沈晓黎 [1] ; 汪泱 [2] ; 邓志锋 [1,3]

【关键词】 外泌体 间质干细胞 旋转超

摘要】目的建立一种利用旋转超滤技术从骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)培养上清液中分离外泌体(exosome)的方法。方法收集BMSCs细胞培养上清,低速离心去除残余细胞,0.22“m滤器过滤除去细胞碎片,采用旋转超滤技术提取外泌体。应用透射电子显微镜观察所获外泌体的形态,用蛋白质印迹法检测外泌体标记物CD63、CD9蛋白的表达,用CCK-8试剂盒检测外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖活性的影响。结果使用旋转超滤技术成功分离出BMSCs分泌的外泌体,透射电镜下外泌体为圆形或椭圆形,直径约100nm,蛋白质免疫印迹法检测结果显示外泌体中有其特异标记物CD63、CD9蛋白的表达。外泌体能够促进HUVECs增殖,并且其促细胞增殖作用随浓度增高而增强。结论旋转超滤技术是一种简单有效的提取外泌体的方法。

上一篇:原发性肝癌患者甲胎蛋白基因多态性与其在外周血中表达水
下一篇:视觉-前庭感觉-本体感觉错配适应大鼠海马CA1区位置细胞的

        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
        单位地址:上海市杨浦区翔殷路800号第二军医大学学报编辑部
        邮编:200433