【摘要】目的构建人蛋白激酶R样内质网激酶（protein kinase R-like ER kinase,PERK）慢病毒载体并包装慢病毒颗粒（lentivirus）,探讨成肌细胞C2C12中PERK基因慢病毒修饰对内质网应激介导凋亡的作用。方法设计并合成人PERK基因的上、下游引物,采用PCR方法从真核质粒pcDNA3.l（-）-PERK中扩增目的基因。鉴定后与慢病毒载体pWPT-GFP进行重组,再将重组慢病毒载体pWPT-GFP-PERK与慢病毒包装质粒pMD2G、pSPAX2共转入293T细胞中,进一步包装形成PERK慢病毒（LV-PERK）;收集转染后48h的细胞上清,体外感染成肌细胞C2C12,观察绿色荧光蛋白（GFP）感染效率,并应用流式细胞仪（FCM）检测内质网应激时重组慢病毒PERK对C2C12细胞增殖凋亡的影响,蛋白质印迹法检测凋亡相关基因Cleaved Caspase-3与Chop蛋白的表达。结果成功构建和包装了滴度为4.2×108 efu/mL的PERK重组慢病毒。FCM检测结果表明,TM＋LV-PERK处理组G1期细胞比例为54.37%,低于TM组（77.91%）和LV-GFP组（66.41%）;TM＋LVPERK处理组S期细胞比例为31.36%,高于TM组（12.14%）和LV-GFP组（16.96%）,各组差异均具有统计学意义（P〈0.05）;此外,TM＋LV-PERK处理组细胞凋亡率为25.91%,高于TM组（11.79%）和Ad-GFP组（11.24%）,各组差异具有统计学意义（P〈0.05）。免疫印迹检测Cleaved Caspase-3和Chop蛋白的表达与FCM结果一致。结论成功构建和包装LVPERK重组慢病毒颗粒,在内质网应激时,LV-PERK慢病毒可促进C2C12细胞的增殖和凋亡。