一种从唾液中快速提取基因组DNA的方法
【作者】
杨泽民
[1] ;
林静
[1] ;
陈龙辉
[2] ;
张敏
[3] ;
陈蔚文
[2]
【关键词】
唾液
碘化钾DNA提取
聚合
【摘要】目的探索一种快速、有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法。方法比较碘化钾法和口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53、PRB-3基因PCR扩增效果。同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验证碘化钾法提取唾液基因组DNA的稳定性。结果两种DNA提取方法都能从新鲜唾液标本中获得高质量的基因组DNA,其中碘化钾法的得率和Dzeo/D280分别为(1.91±0.15)/μg和1.99±0.05,试剂盒法分别为(2.64±0.34)μg和1.81±0.02。对于室温放置1周的唾液标本,两种提取方法获得的DNA虽然降解明显,但是对TP53和PRB-3基因都能扩增正确大小的目的片段。碘化钾法提取的99名健康儿童和成人的唾液基因组DNA虽然个体差异明显[得率为(1.89±0.46)μg],但是DNA质量稳定可靠(Dzso/D280为1.96土0.10)。结论碘化钾法提取唾液基因组DNA不仅廉价、高效,而且对人体无创伤,非常适合大范围分子流行病学研究。
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