【摘要】目的探讨硫化氢（H2S）对Aβ25-35诱导的小鼠成神经细胞瘤细胞Neuro-2a自噬的影响及其潜在机制。方法将Neuro-2a细胞随机分为空白对照组、Aβ25-35处理组、Aβ25-35＋NaHS组、Aβ25-35＋3-甲基腺嘌呤（3-MA）组、NaHS组及Aβ25-35＋NaHS＋LY294002组。Aβ25-35＋NaHS组和Aβ25-35＋3-MA组细胞分别用NaHS和3-MA预处理2h后均加用Aβ25-35继续处理24h;Aβ25-35＋NaHS＋LY294002组除加入NaHS预处理外需在Aβ25-35处理前0.5h加入特异性PI3K/Akt通路抑制剂LY294002。采用MTT法观察各组细胞存活率,蛋白质印迹法检测自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白（LC3）及P62的表达,免疫荧光法检测LC3的表达及分布,透射电镜法观察自噬体的形成。结果 （1）与空白对照组相比,Aβ25-35作用细胞后细胞存活率降低（P〈0.05）,Beclin-1及LC3-Ⅱ表达增加,P62表达降低（P〈0.05）,荧光显微镜及电镜下可见细胞自噬体明显增多。（2）与Aβ25-35组相比,Aβ25-35＋3-MA组和Aβ25-35＋NaHS组细胞存活率均增高（P〈0.05）,Beclin-1及LC3-Ⅱ表达降低,P62表达增高（P〈0.05）,自噬体减少。（3）Aβ25-35＋NaHS组p-Akt和p-mTOR的表达高于Aβ25-35组（P〈0.05）,而加入LY294002后,Aβ25-35＋NaHS＋LY294002组细胞p-Akt和p-mTOR表达与Aβ25-35＋NaHS组相比降低（P〈0.05）。结论外源性H2S能对抗Aβ25-35的细胞毒性,可能与活化PI3K/Akt/mTOR途径抑制Aβ25-35引起的细胞自噬相关。