【摘要】目的探讨西罗莫司对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖、起始识别复合物1（ORC1）表达的影响及机制。方法细胞随机分为对照组和实验组,每组3瓶/孔,血清饥饿法培养细胞24h使其同步化。对照组采用含10%胎牛血清的DMEM培养液培养,实验组采用含10μmol/L西罗莫司＋10%胎牛血清的DMEM培养液培养。继续培养0～48h,采用免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达,电子显微镜观察细胞超微结构,RT-PCR法检测ORC1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测P53、cyclin D1、cyclin A和ORC1蛋白的表达。结果与对照组相比,实验组48hPCNA阳性表达率降低[（20±2.1）%vs（80±3.0）%,P〈0.05],P53蛋白表达升高（P〈0.05）;细胞核有固缩的迹象;实验组cyclin D1蛋白表达轻微升高（P〉0.05）,48hcyclin A蛋白的表达下降（P〈0.05）。对照组ORC1mRNA的表达在0～12h升高,24～48h降低,高峰期在12h。实验组细胞ORC1mRNA的表达始终处于高水平。与同时间对照组比较,实验组48hORC1mRNA的表达升高（P〈0.05）。蛋白质印迹分析结果与之相似。结论西罗莫司抑制VSMCs增殖,同时促进其凋亡;其作用环节可能是通过阻止细胞由G0/G1期向S期转化,诱导细胞处于静止状态;ORC1的作用环节位于西罗莫司作用点的上游,进一步支持ORC1参与细胞复制起始过程。