肿瘤坏死因子α调控启动子活性促进netrin-1的表达
【作者】
白久旭
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曹宁
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韩敬明
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李旭
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王东辉
【关键词】
netrin-1
肿瘤坏死因子α
【摘要】目的探讨TNF-α对netrin-1基因表达的影响,并对其调控机制作初步研究。方法采用RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测TNF-α对netrin-1表达的影响。用PCR反应扩增netrin-1启动子序列,克隆至pGL3荧光素酶报告基因载体,转染HEK-293A细胞,通过检测荧光素酶活性观察TNF-α对netrin-1转录水平的表达调控。结果 TNF-α(20ng/ml)能上调netrin-1的表达。成功构建pGL3-netrin-1-promoter荧光素酶表达载体,并证实构建的报告基因载体启动子具有活性;发现TNF-α可使netrin-1启动子活性增加(P〈0.05),并以剂量和时间依赖方式调节netrin-1启动子的活性。结论细胞因子TNF-α可能通过调控启动子的活性而调节netrin-1的表达。
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