【摘要】目的将Tet—On系统与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）或肝细胞生长因子（HGF）共同构建于一新型重组杆状病毒载体，并以不同浓度的多西环素（DOX）调控EGFP及HGF表达。方法酶切重组质粒pFast—Tet、pTRE-EGFP和pTRE-HGF，回收目的片段后连接pFast-Tet，分别转化含有AeMNPVBacmid和helper质粒的DHl0Bac感受态细胞，筛选后提取BacmidDNA并鉴定（命名为Ac—EGFP和Ac--HGF）。将Ac—EGFP和Ac—HGF感染骨髓间充质干细胞，加入不同浓度的DOX调控EGFP（DOX浓度为0、200、500、1000ng／mL）和HGF（DOX浓度为0、10、100、500、1000、1200ng／mL）的表达。在荧光显微镜下观察EGFP的表达，用ELISA法检测HGF的表达量。结果经鉴定EGFP、HGF与Tet—On系统成功构建在同一杆状病毒载体，且在骨髓间充质干细胞中具有较高的感染率。在较高浓度DOX调控下改造后的重组杆状病毒可高表达EGFP和HGF，低浓度或无DOX时表达量逐渐减低。结论本研究证实可将Tet—On系统与EGFP或HGF共同构建于一新型重组杆状病毒载体，改造后的重组杆状病毒能稳定、高效感染骨髓间充质干细胞，不同浓度的D0x可调控EGFP及HGF的表达，无DOX时呈低本底。