Rtn4-A／B基因敲除小鼠模型的制备

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【作者】朱莹 [1] ; 胥武剑 [1] ; 宁允叶 [1] ; 吴琳 [2] ; 卢建 [3] ; 李强 [1]

【关键词】 Rtn4 基因打靶基因敲除小

【摘要】目的通过制备Rtn4～A／B基因敲除小鼠，探索Rtn4-B基因的生物学功能。方法用细菌人工染色体（BAC）载体构建Rtn4-A／B基因打靶载体并使其线性化，通过电转化法将其转入129SvEv品系雄性小鼠胚胎干细胞（embryonicstemcell，ES细胞）。将正确同源重组的ES细胞注射人C57BL／6J小鼠囊胚腔，繁育出嵌合体小鼠后，进一步繁殖以获得杂合子小鼠。抽提小鼠尾尖组织DNA，采用PCR法鉴定小鼠的基因型。结果基因打靶后，得到14个发生双臂正确同源重组Es细胞克隆。利用阳性ES细胞克隆进行囊胚内显微注射，得到5只嵌合率大于50％的雄鼠，最终繁育得到4只Rtn4-A-B如。杂合子小鼠。结论利用ES细胞基因打靶、同源重组等方法，成功获得Rtn4-A／B基因敲除杂合子小鼠。

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Rtn4-A／B基因敲除小鼠模型的制备

【作者】 朱莹 [1] ; 胥武剑 [1] ; 宁允叶 [1] ; 吴琳 [2] ; 卢建 [3] ; 李强 [1]

【关键词】 Rtn4 基因打靶 基因敲除小

【作者】朱莹 [1] ; 胥武剑 [1] ; 宁允叶 [1] ; 吴琳 [2] ; 卢建 [3] ; 李强 [1]

【关键词】 Rtn4 基因打靶基因敲除小