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骨髓间充质干细胞的分离鉴定及向血管内皮细胞诱导分化过

【作者】 吴弘 [1] ; 徐晓晶 [2,3] ; 吴峰 [1] ; 储国俊 [1] ; 赵仙先 [1] ; 秦永文 [1]

【关键词】 骨髓 间充质干细胞 内皮细

摘要】目的建立分离大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)及将其定向诱导分化为血管内皮细胞(endothelialcells,EDCs)的方法,并通过观察microRNAl26的表达规律初步探索其在定向分化中的调控作用。方法通过反复贴壁及人工分选方法进行大鼠骨髓MSCs的体外分离纯化及扩增,运用免疫荧光法检测MSCs中CD34、CDl05和CD73的表达。应用MEF诱导分化培养液将MSCs定向诱导分化为EDCs,采用qRT—PCR法检测细胞诱导分化过程不同时间点EDCs特征基因CD34、血管内皮钙黏蛋白(VE—cadherin)及调控小RNA分子microRNAl26的表达。结果经分离纯化的骨髓MSCsCD34呈阴性表达,CDl05呈强阳性表达,CD73呈阳性表达,证实骨髓MSCs分离成功,且细胞均一性较好,占细胞总数的90%以上。MSCs定向诱导为EDCs早期分化过程中,在诱导前期第1~4天,VE-cadherin和CD34基因呈阴性表达;第5~6天VE-cadherin和CD34表达显著;第7~9天,VE-cadherin呈持续阳性表达,而CD34于第7天下降,第8~9天又呈阳性表达。microRNAl26在分化过程中的表达趋势与CD34一致。结论成功建立了骨髓MSCs的分离方法及定向诱导分化为EDCs的方法;microRNAl26在MSCs向EDCs的定向分化过程中可能起一定的调控作用。

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        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
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        邮编:200433