小鼠骨髓间充质干细胞、骨髓单核细胞和胚胎成纤维细胞重
【作者】
王尧
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王雷
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陆玉华
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范向军
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朱铭岩
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朱沙俊
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王志伟
【关键词】
诱导性多潜能干细胞
重编程
【摘要】目的比较小鼠骨髓问充质干细胞(BMSCs)、小鼠骨髓单核细胞(BM—MNCs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程为诱导性多能干细胞(iPS细胞)的效率。方法用慢病毒LV—ella—mOct4-IRES-EGFP、LV—ella—mSox2-IRES-EGFP、LV—ella—mKlf4一IRES-EGFP和LV—ella—mc-Myc—IRES—EGFP感染BMSCs、BM—MNCs和MEFs,通过计算碱性磷酸酶染色阳性克隆数比较这3种细胞重编程为iPS细胞的效率。用胚胎干细胞表面标记检测、胚胎干细胞内源基因检测、拟胚体形成实验和畸胎瘤形成实验验证重编程获得的iPS细胞的多能性。结果起源于小鼠BMSCs、BMMNCs及MEFs的3种iPS细胞均能形成边缘光整的致密克隆,可表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1,并能在体内外分化为三胚层组织。但是BMSCs来源的碱性磷酸酶阳性克隆数低于BM—MNCs和MEFs来源的克隆数。结论小鼠BMSCs、BMMNCs及MEFs均可重编程为iPS细胞,但BMSCs重编程为iPS细胞的效率低于BM—MNCs和MEFs。
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