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荧光光谱分析5种黄连生物碱与蛋白和DNA的作用

【作者】 杨勇 [1] ; 贺凯 [1] ; 张保顺 [2] ; 吴方评 [1] ; 黄军 [1] ; 李学刚 [2]

【关键词】 黄连生物碱 牛血清白蛋白

摘要】目的了解5种黄连生物碱(巴马亭、黄连碱、表小檗碱、药根碱和小檗碱)与生物大分子蛋白质和DNA的作用关系及其差异。方法将黄连生物碱巴马亭、黄连碱、表小檗碱、药根碱和小檗碱均配成浓度分别为0、1.95×10^-6、3.9×10^-6、7.8×10^-6、1.56×10^-5和3.12×10^-5mol/L的PBS稀释液后,分别量取1.5mL与0.5mL牛血清白蛋白(BSA,1.10×10^-5mol/L)溶液作用,采用F-4500型荧光分光光度计,在280nm激发波长条件下扫描300-500nm范围的荧光发射光谱。将浓度均为0、1.95×10^-6、3.9×10^-6、7.8×10^-6和1.56×10^-5mol/L的5种黄连生物碱PBS稀释液各量取1.5mL与0.5mL百分浓度为0.i%的质粒DNA作用后,在368nm激发波长条件下扫描480~650nm范围的荧光发射光谱。结果5种黄连生物碱对BSA荧光均有很强的淬灭作用,各生物碱之间的荧光淬灭作用差异不大。5种黄连生物碱与质粒DNA作用后,均能增强发射荧光,且各生物碱之间的荧光增强作用差异很大,荧光增强作用由大到小依次为表小檗碱、黄连碱、巴马亭、小檗碱和药根碱,其中,表小檗碱和黄连碱增强作用远大于其余3种黄连生物碱;5种黄连生物碱的最强荧光作用浓度均为7.8×10^-5mol/L。结论5种黄连生物碱与蛋白和DNA均存在很强的相互作用。5种黄连生物碱与蛋白之间的作用差异较小,与DNA之间的作用差异较大,提示黄连生物碱与DNA的作用强度与其分子结构有关,该类分子中9,10-亚甲二氧基和2,3-二甲氧基结构有利于与DNA作用后的荧光增强作用。

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        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
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