Fth1基因标记对骨髓间充质干细胞生物学特性及体外MRI表现
【作者】
薛杨
[1] ;
黄晓蕾
[1] ;
蔡伶伶
[1] ;
王博成
[1] ;
詹青
[2] ;
赵江民
[1]
【关键词】
铁蛋白报告基因
骨髓间充质
【摘要】目的观察铁蛋白报告基因Fth1标记对骨髓间充质干细胞(MSCs)生物学特性及体外MRI表现的影响。方法原代分离培养大鼠MSCs,取第4代MSCs,用构建的携带铁蛋白重链基因Fth1的慢病毒载体进行感染,并在培养液内加入1mol/L柠檬酸铁进行培养。采用普鲁士蓝染色检测MSCs的摄铁能力,锥虫蓝染色活细胞计数检测MSCs的细胞存活率,CCK-8方法测定MSCs的增殖活性。应用MRI的FSE T2WI和SWAN序列观察Fth1标记的MSCs和未标记MSCs MRI信号的差异。结果 Fth1基因可成功转染MSCs,转染MSCs的普鲁士蓝染色标记效率为87%。未加含铁培养液的Fth1标记MSCs细胞存活率为(92.17±1.91)%,细胞增殖活性D值为1.094±0.068,与未标记MSCs比较差异均无统计学意义[细胞存活率为(94.23±2.42)%,细胞增殖活性D值为1.027±0.122;P〉0.05);加入含铁培养液培养3d后的Fth1标记MSCs细胞存活率为(77.47±4.10)%,细胞增殖活性D值为0.493±0.024,与未加含铁培养液的Fth1标记MSCs及未标记MSCs比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。MRI扫描FSE T2WI和SWAN序列显示,加入含铁培养液培养5d后Fth1标记MSCs信号强度为656.6±18.2,与未加含铁培养液的Fth1标记MSCs及未标记MSCs比较差异均有统计学意义(分别为807.3±17.1和847.1±10.5,P〈0.05),而未加含铁培养液的Fth1标记MSCs与未标记MSCs比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 Fth1报告基因可成功转染MSCs,转染后的MSCs可高效表达并摄取铁;细胞活力及增殖活性在不含铁的培养液中不受影响,但在铁浓度1mol/L含铁培养液中受到一定影响;经含铁培养液培养5d后,MRI可体外检测Fth1标记MSCs,其FSE T2WI和SWAN序列呈低信号改变。
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