MicroRNA-205抑制黑素瘤细胞迁移和侵袭的作用及其机制
【作者】
陈虎艳
王上上
姜敏
张乔安
陈连军
复旦大学附属华山医院皮肤科
上海200040
【关键词】
microRNA-205
黑素瘤
上皮
【摘要】目的 探讨microRNA-205(miR-205)表达对人类黑素瘤细胞株(A375和A2058)迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法 转染miR-205过表达慢病毒(Lenti-miR-205)构建miR-205过表达的黑素瘤细胞A375和A2058细胞系(miR-205组),转染空白对照慢病毒作为对照细胞系(NC组)。通过划痕实验和Transwell实验分别检测两组细胞迁移和侵袭能力,激光共聚焦扫描显微镜观察细胞形态和表达钙黏蛋白E(E-cadherin)的细胞数量与荧光强度,蛋白质印迹法检测E-cadherin、Twist、整合素(intergrin)、波形蛋白(vimentin)、Zeb1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果 培养8 h和24 h时miR-205组A375与A2058细胞的迁移能力均大于NC组(P〈0.01);miR-205组两种细胞的侵袭能力均低于NC组(P〈0.01)。MiR-205过表达后A375和A2058细胞均由梭形、基质型向圆形、表皮型转化。与NC组相比,miR-205组细胞E-cadherin蛋白表达增加(P〈0.01),且表达E-cadherin的细胞数量和荧光强度均增加;Twist、intergrin、vimentin、Zeb1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低(P〈0.01)。结论 MiR-205通过诱导E-cadherin的表达逆转上皮间质转化,从而抑制黑素瘤细胞的迁移和侵袭。
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