LIM同源盒基因8对卵巢癌细胞SKOV3生物学行为的影响
【作者】
黄铮
马伟
陆欢
王斌
金国华
吕广明
张新化
张睿
上海交通大学附属第六人民医院南院妇产科
上海201499
南通大学医学院解剖教研室
南通226001
上海交通大学附属第六人民医院妇产科
上海200233
【关键词】
卵巢肿瘤
LIM同源盒基因8
【摘要】目的探讨LIM同源盒基因8(Lhx8)对卵巢癌细胞株SKOV3增殖、转移和侵袭的影响。方法采用Lhx8过表达慢病毒(LV-Lhx8)转染卵巢癌细胞株SKOV3构建过表达模型;设阴性对照慢病毒(LV-NC)组通过Lipofectamine 2000转染Lhx8-siRNA构建细胞干扰模型并设阴性对照序列(FAM-siRNA;NC)组;野生(WT)组细胞仅给予等量不含病毒或任何干扰片段的转染试剂。通过免疫荧光、蛋白质印迹法和qPCR验证过表达和干扰效果。采用EDU和细胞周期实验检测过表达或干扰Lhx8后细胞的增殖能力;采用Transwell和划痕实验分别检测转染后细胞的迁移和侵袭能力。结果 Lhx8过表达组SKOV3细胞中Lhx8的表达高于LV-NC和WT组(P〈0.01),干扰后Lhx8的mRNA和蛋白表达均降低,与NC和WT组相比差异有统计学意义(P〈0.01)。与WT和LV-NC组相比,Lhx8过表达抑制SKOV3细胞的增殖(P〈0.01),而干扰Lhx8后其增殖能力增加(P〈0.01);细胞周期实验结果示过表达Lhx8能够增加进入G0/G1期的细胞数目,从而抑制细胞增殖(P〈0.01),干扰Lhx8表达后进入S期的细胞数目多于WT和NC组(P〈0.01)。划痕和Transwell实验结果示SKOV3细胞过表达Lhx8后其迁移和侵袭能力均低于WT和LV-NC组(P〈0.01),干扰Lhx8表达后细胞的迁移和侵袭能力均高于WT和NC组(P〈0.01)。SKOV3细胞过表达Lhx8后基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达均低于WT和LV-NC组(P〈0.01),干扰Lhx8后MMP-2、MMP-9表达均高于WT和NC组(P〈0.01)。结论 Lhx8能够抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,同时能够下调MMP-2和MMP-9的表达。
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