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S100A6基因沉默对人食管癌Ecal09细胞增殖活性和迁移能力

【作者】 陆文铨 [1] ; 邱彦 [2] ; 庞涛 [1] ; 陶霞 [1] ; 陈万生 [1]

【关键词】 食管肿瘤 S100A6 基因沉默

摘要】目的观察S100A6基因沉默对人食管癌Eca109细胞增殖活性及迁移能力的影响。方法查找人S100A6mRNA序列,设计针对其编码区的siRNA序列;根据siRNA序列设计合成shRNA并构建shRNA重组表达载体;用阳离子脂质体转染重组质粒至Ecal09细胞,于转染后48h,采用real-timePCR法检测细胞中S100A6mRNA表达量,蛋白质印迹法检测细胞中S100A6蛋白表达量;MTT法检测细胞增殖活性,绘制细胞生长曲线;通过细胞划线法检测基因沉默对于肿瘤细胞迁移能力的影响。结果成功构建了针对S100A6基因的shRNA真核表达载体;通过脂质体转染的方法可在Ecal09细胞内高效沉默S100A6,细胞转染后48h,与未转染细胞比较,S100A6mRNA表达量降低,且差异有统计学意义(P〈0.05,P〈0.01),蛋白表达量检测结果与mRNA检测结果一致;S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Ecal09细胞增殖活性,与未转染细胞比较,差异有统计学意义(P〈0.01);S100A6基因沉默可明显抑制对数生长期Ecal09细胞迁移能力。结论通过shRNA表达载体途径可在Ecal09细胞中有效沉默S100A6基因,S100A6基因沉默能够显著抑制Ecal09细胞增殖活性及迁移能力。

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        出版单位:《第二军医大学学报》编辑部
        单位地址:上海市杨浦区翔殷路800号第二军医大学学报编辑部
        邮编:200433